Реакция вассермана с антигенами

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

Реакция преципитации (РП) — это выпадение в осадок специфического иммунного комплекса, состоящего из растворимого антигена и специфического антитела в присутствии электролита.  Образующееся в результате реакции мутное кольцо или осадок называется преципитат. Разновидностью преципитации является реакция флоккуляции (по Рамону, Ramon)— появление опалесценции или хлопьевидной массы (иммунопреципитации) при при смешении токсина с соответствующей иммунной сывороткой (реакции токсин- антитоксин или анатоксин- антитоксин).

Вскоре после открытия комплементсвязывающего теста было установлено, что реакцию между вассермановским антигеном и сифилитическими сыворотками можно обнаружить по преципитации (флокуляции). Феномен образования преципитата при смешивании липоидного антигена с сывороткой или плазмой крови больного сифилисом был описан Michaelis в 1907 году.

Это стало основой для разработки множества технических модификаций флокуляционного кардиолипинового теста на сифилис. Благодаря простоте, возможности стандартизации, дешевизне и скорости выполнения, они вытеснили из клинической практики классическую реакцию Вассермана и в настоящее время широко используются для скрининга сифилисной инфекции.

Осадочные тесты — цитохолевую реакцию Закс-Витебского и реакцию Кана — в течение длительного времени применяли в составе комплекса стандартных реакций (КСР) для диагностики сифилиса. Исследование проводили в пробирках, в качестве антигена использовали оригинальные прописи, включающие в себя кардиолипин, холестерин и лецитин в различных пропорциях, при этом не требовалось дополнительного введения комплемента. Образующийся комплекс микрофлоккулята был виден невооруженным глазом.

В последующие годы при модификации с целью повышения качества кардиолипин-холестерол-лецитинового антигенного комплекса были разработаны и предложены различные коммерческие варианты методики выполнения флоккуляционных тестов (VDRL, USR, RPR, TRUST), отличающиеся как по техническим параметрам проведения реакции, так и по применяемому антигену (соотношению композитных частей).

Реакция вассермана с антигенами

Флоккуляционные реакции на основе кардиолипинового антигена относят к нетрепонемным реакциям по причине того, что антиген получают не из возбудителя сифилиса (бледной трепонемы), а при технологическом соединении высокоочищенных биологических реагентов животного происхождения (холестерина, кардиолипина и лецитина). Соотношение ингредиентов антигена в настоящее время стандартизировано.

Быстрый плазмареагиновый тест RPR — это быстрый тест для качественного и количественного определения реагиновых антител в сыворотке или плазме крови. Его относят к макроскопическим нетрепонемным флоккуляционным тестам по выявлению антител, ассоциированных с сифилисом. 

1. История метода

Эта реакция была разработана J.Portnoy и соавторами (1957) для массового и быстрого скрининга населения с использованием образцов сыворотки или плазмы. Реакция проводится на пластиковых планшетах с впечатанными кружочками. 

2. Принцип метода

При добавлении к плазме или сыворотке крови больного сифилисом суспензии стабилизированного кардиолипинового антигена в смеси с мелкодисперсными частицами древесного угля происходит образование комплексов антиген-антитело, собирающих частицы древесного угля в более крупные агрегаты; при этом результат реакции становится возможным учитывать невооруженным глазом.

3. Постановка теста

Авторы метода в 1961 году предложили модификацию RPR на специальных картонных карточках с выдавленными круглыми плоскими неглубокими лунками диаметром 18 мм.

Капля исследуемого образца (неразведенная плазма или сыворотка крови) смешивается в лунке с каплей стабилизированного стандартного кардиолипинового антигена, в который добавлены частицы мелкодисперсного угля (RPR-антиген). Затем в течение 8 мин планшету вращают на орбитальном ротаторе со скоростью 100 об.

/мин, чем достигается стандартизация условий равномерного перемещения нанесенных реагентов. В состав набора входят положительный и отрицательный контроли. Учет результатов проводится при хорошем освещении, когда еще не высохла поверхность кружка. При образовании комплексов антиген-антитело мелкодисперсные частицы угля попадают в образовавшуюся сеть и коагулируют.

Анализ крови на сифилис

Для определения специфического характера позитивных результатов исследования крови в RPR проводят дополнительные исследования в подтверждающих реакциях, основанных на применении антигенов бледной трепонемы (ИФА, РПГА, РИФ, РИТ).

4. Учет результатов

«положительный» — при обнаружении средних и больших агрегатов, 

«слабоположительный» — выявляются редкие небольшие агрегаты, 

«отрицательный» — ровная серая поверхность без видимых агрегатов. 

При положительных результатах рекомендуется исследовать RPR-тест в полуколичественной постановке (разведения от 1:2 до 1:1024). 

5. При каких периодах заболевания лучше использовать

Реакция становится положительной спустя 2—4 недели после появления твердого шанкра.

Ограничениями применения метода RPR являются ранние стадии сифилиса (период инкубации, начало первичного периода), так как данная реакция становится позитивной лишь спустя 2—4  недели после появления твердого шанкра, и поздние стадии (поздний скрытый и третичный сифилис), так как лабильные преципитины первыми элиминируются из организма при длительном течении сифилитической инфекции.

6. Чувствительность и специфичность

Специфичность RPR-теста составляет 98%, а чувствительность зависит от стадии заболевания: при первичном сифилисе — 86%, при вторичном — 100%, при скрытых формах — 98%, при позднем сифилисе — 73% (Кунгуров Н.В. и соавт., 2002). 

7. Область применения метода

Применение указанной реакции при серодиагностике сифилиса регламентировано Приказом Минздрава РФ №87 от 26 марта 2001 года «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» (приложением №1 «Постановка отборочных и диагностических тес¬тов на сифилис»).

Содержание антител-преципитинов в крови после адекватного специфического лечения сифилиса постепенно понижается, что находит отражение сначала в снижении титров, а затем и степени позитивности RPR, которая из резко положительной становится слабоположительной, а затем — отрицательной. В связи с этим RPR используют для оценки эффективности лечения и как один из критериев установления излеченности или при дифференциальной диагностике реинфекции.

8. Источники и причины ошибок при постановке, ложноположительные и ложноотрицательные результаты

Ложноотрицательные результаты. Точно так же, как и в тесте VDRL, при постановке RPR «феномен прозоны» может наблюдаться при постановке с выоскореактивными образцами сывороток. Этот эффект иногда возникает при анализе сывороток, взятых у больных вторичным сифилисом. Поэтому при постановке рекомендуется титрование до тех пор, пока результат не станет однозначным, особенно в случае позитивности трепонемного теста для этого же пациента. 

Ложноположительные результаты (ЛПР) могут быть острыми и хроническими, в зависимости от того, насколько долго они сохраняются: острые — менее 6 месяцев, хронические — 6 месяцев и более. 

Причины острых ЛПР: гепатит, мононуклеоз вызыванный вирусом Эпштейн-Барра, вирусная пневмония, малярия, прививки, беременность, сердечно-сосудистые заболевания, технические ошибки при постановке реакции.

Причины хронических ЛПР: болезни соединительной ткани, болезни иммунной системы, наркомания, лепра, туберкулез, онкопатология, ВИЧ-инфекция, сердечно-сосудистые заболевания, многочисленные переливания крови.

Технические причины ошибочных результатов теста RPR

Реакция быстрого определения реагинов плазмы крови с кардиолипиновым антигеном является относительно несложным исследованием; тем не менее при ее выполнении необходимо соблюдать все рекомендации производителей диагностикума и правила работы в клинико-диагностической лаборатории.

Источником ошибок при постановке RPR могут являться следующие моменты:

исследование в реакции гиперлипидемичной, гемолизированной сыворотки крови или образцов с признаками бактериального пророста;

исключение из постановки реакции контрольных сывороток крови, в частности, слабо-положительных;

неравномерная концентрация антигена в диагностикуме вследствие недостаточного его перемешивания перед использованием;

нарушение сроков учета результатов реакции, подсыхание реакционной среды на пластинах с формированием псевдофлоккулятов в краевой зоне;

нарушение сроков и условий хранения антигена и физиологического раствора; использование диагностикума с истекшим сроком годности;

несоблюдение параметров работы орбитального шейкера (скорости и времени вращения);

использование при постановке реакций загрязненных пробирок, пипеток, наконечников пипеточных дозаторов, реакционных пластинок, растворов;

недостаточная тщательность выполнения последовательных двукратных разведений.

Вышеуказанные ошибки могут приводить к появлению как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов реакции.

9. Особенности, преимущества и недостатки

Методика исследования в RPR проста в исполнении, недорога, не требует специального оборудования и не занимает длительного времени; при этом реакция демонстрирует высокую чувствительность и специфичность. Большинство исследователей отмечают самую высокую чувствительность RPR среди нетрепонемных тестов при всех стадиях сифилиса.

Важным условием является то, что все производимые в мире RPR-наборы являются стандартизированными, что делает их результаты сопоставимыми. Вместе с тем положительные результаты RPR-теста не могут безоговорочно трактоваться как наличие сифилитической инфекции в организме исследуемого пациента без подтверждения трепонемными тестами. RPR-тест непригоден для исследования спинномозговой жидкости.

RPR-тест не является строго специфической реакцией на сифилис. В сыворотке крови людей реагиновые антитела нередко обнаруживают при системных поражениях паренхиматозных органов (печени, почек, легких), при инфаркте миокарда, пневмонии, сотрясении мозга, атеросклерозе, при коллагенозах, онкологических заболеваниях, ряде инфекций (туберкулезе, сыпном тифе, малярии, лепре), при ревматизме, некоторых патологических и физиологических состояниях (тиреотоксикозе, беременности, менструации). Положительные результаты RPR наблюдают после злоупотребления алкоголем, приема жирной пищи, на фоне медикаментозной терапии. Количество ложноположительных результатов увеличивается при исследовании образцов крови пожилых людей.

Суть реакции Вассермана

К взятому образцу крови обследуемого  добавляют кардиолипиновый антиген и комплекс сложных белков-агрессоров. В случае наличия в сыворотке крови белковых антител-защитников, антиген связывается с этими антителами и остается в осадке. В таком случае врачом ставится положительный результат реакции, что значит, что у пациента сифилис.

В крови людей, не зараженных сифилисом, таких белковых антител нет. Соответственно антиген, не имея необходимых для реакции условий, не может выпасть в осадок. Вместо этого он принимает участие в гемолизе эритроцитов. Такой результат теста расценивается медиками как отрицательный, подтверждающий факт здорового состояния обследуемого.

Возможные результаты реакции:

  • отрицательная (-) — пациент здоров, гемолиз эритроцитов в крови функционирует должным образом;
  • сомнительная ( ) — малоинформативный результат, требующий повторного проведения реакции и дальнейших обследований;
  • слабоположительная ( ) — гемолиз эритроцитов происходит с незначительной задержкой;
  • положительная ( ) — сильно замедленный гемолиз, высокие шансы заболевания;
  • абсолютно положительная или ложноположительная ( ) — наивысшие шансы на то, что у пациента сифилис, поскольку гемолиз не происходит вообще; также может возникать вследствие иных заболеваний, что требует более специализированной диагностики.

Реакция Вассермана в современной медицине

Несмотря на то, что обозначение RW, являющееся сокращением от «реакция Вассермана», повсеместно используется в медицинской документации и сегодня, практика проведения этой реакции отошла в прошлое и более не поддерживается современной медициной.

Виной этому высокий риск ложноположительных результатов и низкая чувствительность обследования к ранним стадиям развития сифилиса. Актуальный аналог реакции Вассермана — RPR, атифосфолипидный тест. Эти два подхода объединяет то, что RPR, как и RW, не считается высокоточным специализированным методом диагностики и для него также используют кровь, взятую из вены. Однако RPR обладает более высокой точностью на всех стадиях развития болезни.

Еще больше увеличить точность может следование простым советам:

  • ограничить себя в жирной пище за сутки до проведения теста;
  • отказаться от употребления алкоголя в день, предшествующий реакции;
  • не курить непосредственно перед диагностикой;
  • пройти тест натощак.

Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком ( ). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или ), слабоположительной ( ), положительной ( ) и резко положительной ( ).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело.

В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в ( ) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Показания к диагностике

Положительный тест RPR может быть определен по истечении от трех до пяти недель с момента поражения организма сифилисом или спустя неделю-полторы от первого образования твердого шанкра, являющегося основным видимым симптомом заболевания.

Что касается поздних, развитых стадий сифилиса, точность их выявления имеет тенденцию к снижению, а примерно в 30% случаев болезни реакция показывает ложноположительный результат.

Выделяют такие основные показания к осуществлению диагностики сифилиса:

  • наркотическая зависимость;
  • беспорядочные связи сексуального характера;
  • психические отклонения и болезни центральной нервной системы (для диагностирования нейросифилиса);
  • вынашивание плода;
  • донорство крови;
  • работа в больницах и других медицинских учреждениях;
  • проявление симптомов заболевания (в частности, образование сифилитического шанкра);
  • тесные контакты с людьми, больными сифилисом;
  • рождение ребенка от матери с этой болезнью.

Анализ крови RW – реакция Вассермана: что это за анализ, как расшифровать результаты, какова норма

Ложноположительный тест на RW означает отсутствие болезни у обследуемого. Триггерами реакции в этом случае послужили иные заболевания. Среди них:

  • воспаление легких;
  • скарлатина;
  • рак;
  • малярия;
  • гепатит вирусного типа;
  • сахарный диабет;
  • подагра;
  • алкоголизм.

Высокому риску постановки ложноположительного диагноза также подвержены новорожденные и беременные.

Положительный тест с высокой долей вероятности говорит о заболевании сифилисом, уже находящимся на одной из стадий развития. Всего выделяют три фазы:

  • первичная (прошло 1-3 месяца с дня заражения);
  • вторичная (прошло от 3 месяцев до 3 лет с момента заражения);
  • третичная (наличие сифилиса в организме больного свыше 3 лет).
  • Ложноположительный сифилис диагностируют в 10% случаев.
  • Так как анализ на сифилис назначается не только при появлении жалоб у больного, а при прохождении медкомиссии, перед приемом на работу, при беременности, перед госпитализацией, велик процент заражения у людей, которые даже не подозревали о наличии такого заболевания.
  • Чтобы исключить ошибку, необходимо убедиться в достоверности полученных результатов.

Положительные результаты на сифилис делятся на две группы: острые и хронические. Острый ложноположительный результат проявляется в течение 6 месяцев регулярного проведения анализов.

Причины:

  • острые инфекционные нарушения;
  • травмы;
  • любая вакцинация за 1-7 дней до взятия пробы;
  • острое отравление.

При наличии любого из факторов в организме активизирован процесс выработки антител, что и отражается на результатах анализов.

Если имеются хронические нарушения, тест может показывать ошибочные результатыв течение 6 и более месяцев.

Причины:

  • нарушения соединительных тканей;
  • любая форма туберкулеза;
  • хронические нарушения работы печени;
  • ВИЧ, гепатит В, С, D, и другие вирусные заболевания;
  • аутоиммунные процессы в организме.

Ошибочным результат становится по причине систематической выработки неспецифических антител в ответ на одно из перечисленных нарушений.

Чтобы определить, может ли анализ на сифилис быть ошибочным, нужно оценить наличие других факторов проявления заболевания и вероятность инфицирования.

Бледная трепонема — возбудитель заболевания, который передается половым путем через слизистые половых органов, рта и прямой кишки при контакте с инфицированным человеком. Также возможна передача инфекции от зараженной матери ребенку.

Инкубационный период, в течение которого заболевание не дает о себе знать, составляет 2-6 недель. После этого на местах возможного проникновения инфекции образуются сифилитические язвы с плотным основанием.

Через 1-2 недели увеличиваются и становятся болезненными ближайшие к месту поражения лимфатические узлы.

<img src='https://VeneroMed.ru/data:image/svg xml,’=”” title=” alt=’консультация врача’>

При постановке диагноза — сифилис ложноположительный необходимо повторно обратиться в медицинское учреждение. При этом сообщите о всех препаратах, которые вы принимали накануне анализа, хронических и острых заболеваниях.

Если имел место незащищенный секс с непроверенным партнером или вы обнаружили первые признаки заболевания, стоит сообщить об этом врачу.

После сбора анамнеза и проведения осмотра врач назначит вам ряд анализов, которые позволят с погрешностью менее 1% установить точный результат.

Анализы бывают двух видов: нетрепонемные и трепонемные. Первый вариант предполагает использование искусственных аналогов бледной трепонемы, во втором случае используются реальные трепонемы.

Такие методики имеют широкое распространение и чаще всего используются в проведении рядовых медицинских осмотров.

RPR сифилис

Преимуществом является низкая стоимость, быстрый результат, возможность проведения исследований на стандартном лабораторном оборудовании.

Анализ на RW

Для его проведения у пациента берут кровь, реже — спинномозговую жидкость. Кровь может быть взята из пальца или вены. Погрешность при проведении такого исследования может составить до 7%.

Может включать два вида тестов на сифилис RPR и VDRL. В результате распада клеток под воздействием трепонемы образуются антилипидные антитела.

Липиды могут разрушиться под влиянием других нарушений, поэтому степень погрешности при проведении ВДРЛ и РПР составляет 1-3%.

Трепонемные тесты

Такие исследования проводятся не во всех клиниках и требуют наличия дорогостоящего оборудования.

Поэтому они используются при подозрении на наличие заболевания по результатам нетрепонемных тестов. Погрешность таких исследований составляет менее 1%.

Положительная реакция Вассермана: ложноположительная, причины, анализ на рв, rw отрицательный что это значит, ЭДС, кровь, почему

Позволяет определить антигены и антитела. Для определения результата пациент сдает кровь из пальца или вены. В результате тестирование также позволяет установить стадию заболевания.

Анализ на сифилис РПГА позволяет определить процент склеивания эритроцитов. Точный результат реакции пассивной гемагглютинации можно получить на 28 день после инфицирования.

Иммуноферментное оценивание определяет наличие и стадию заболевания по уровню иммуноглобулинов различных типов.

ИФА на сифилис положительный позволяет определить типы иммуноглобулинов, которые формируются после инфицирования в течение 14 дней, 14-28 дней, более 28 дней.

Самый точный тест, позволяющий выявить патогенные ДНК. Он используется в редких случаях, так как требует наличия сложных реактивов.

Вероятность погрешности тестов РИФ, РПГА, ИФА составляет менее 1%. При ПЦР погрешность может составить 0-1%.

У беременных ошибочный результат может наблюдаться в 1,5% случаев при проведении нетрепонемных тестов. Анализ на данный вид заболевания является обязательным в течение всей беременности.

Первый тест на сифилис проводят в 12 недель, потом — в 30 недель и перед родами. Результат может быть ложным по причине естественных изменений организма, а в частности, иммунитета для защиты растущего плода.

Поэтому при беременности может быть назначен повторный тест, нередко он назначается даже при отрицательных результатах первого, если имел место фактор риска.

Также могут быть назначены трепонемные тесты, так как воздействие заболевания на организм ребенка более губительно, чем лечение антибиотиками в случае подтверждения диагноза.

Если в полученном вами бланке с результатом стоит 1-2 плюса, это может говорить о наличии небольшого количества антител. Такие результаты могут проявиться в нескольких случаях:

  • незавершившийся инкубационный период;
  • поздняя форма, спустя 2-4 года;
  • остаточные антитела после излечения заболевания.

В таком случае в обязательном порядке назначается повторная проверка через 2 недели.

Если был произведен ошибочный анализ на сифилис, вам будет назначен повторный. Чтобы его результаты были максимально точными, необходимо правильно подготовиться.

Правила:

  • перед анализом разрешается пить только воду, принимать пищу запрещено;
  • за сутки откажитесь от алкоголя и от курения за 1 час;
  • если вы сдаете кровь из вены, проведите перед этим в состоянии покоя 10 мин;
  • если обострились инфекционные заболевания, проходит менструация или пациент накануне подвергался рентгеновскому облучению, анализ крови на сифилис не проводят.

Также в списке противопоказаний находится ряд препаратов, поэтому если вы проходите лечение, сообщите о принимаемых лекарствах врачу.

Если после проведения нескольких проверок, в том числе трепонемных, результат оказался положительным, стоит принять ряд мер:

  • сообщите об этом половому партнеру, необходимо, чтобы он так же прошел обследование;
  • близкие родственники должны пройти обследование;
  • необходимо провести превентивное лечение близких;
  • в течение всего курса лечения необходимо оформить больничный лист и избегать близкого контакта с другими людьми во избежание передачи инфекции;
  • по окончании лечения выдается справка, которую нужно прикрепить к медицинской карте и предоставлять при проведении обследований на антитела, чтобы у диагностов не возникало вопросов о появлении антигенов в результатах.

Положительная реакция Вассермана: ложноположительная, причины, анализ на рв, rw отрицательный что это значит, ЭДС, кровь, почему

При постановке диагноза информация является конфиденциальной. Она не разглашается при взятии больничного, во всех документах, которые выдаются больницей, название заболевания зашифровано, людям, не имеющим близкого контакта с больным, о постановке данного диагноза не сообщают.

После прохождения лечения пациент полностью безопасен, наличие сифилиса в прошлом не может стать причиной отказа в трудоустройстве или в реализации других прав человека.

Если диагноз подтверждается на ранних стадиях, то вероятность полного излечения составляет 100%. Бледная трепонема одна из немногих за много лет лечения больных пенициллином не выработала к нему защиты.

Сифилис после лечения начальной стадии не оставляет осложнений. Болезнь может привести к инвалидности, если проходило хроническое течение или имело место инфицирование в материнской утробе.

Анализ на определение сифилиса человеку приходится сдавать едва ли не чаще всех: приём на работу, медкомиссии, профилактические осмотры, беременность. Выполнение этих исследований необходимо – они позволяют выявить заболевание на ранних стадиях, когда лечение будет иметь наиболее высокую эффективность.

Полученный положительный результат нередко ставит в тупик человека, особенно при отсутствии каких-либо поводов. Выявление сифилиса ложноположительного – достаточно частое явление, а потому не стоит раньше времени поддаваться панике.

Согласно информации из разных источников, до 30% первичных исследований могут давать неправильный результат. Причин такому явлению достаточно много: изменение состояния организма, соматические заболевания.

Чтобы лучше понять, почему появляются ложные данные, стоит более тщательно разобраться в вопросе проведения исследования.

Методы клинических исследований стремительно совершенствуются с каждым годом. С разработкой новых способов диагностики, ложноположительная реакция на сифилис встречается всё реже. При необходимости диагностика может включать в себя несколько разных методик – это позволяет получить наиболее достоверный результат.

Эти методики направлены на выявление белков, которые образуются в результате активности бледной спирохеты. Они направлены на определение «следов» возбудителя. Такие методы имеют относительно высокий процент погрешности (до 10%). Подобные методики являются неспецифичными, но позволяют по титру антител определять степень заражения.

Микробиологическая диагностика

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

Adblock detector